连续流动化学分析仪的线性校准,核心是:准备→基线与空白→标液梯度→从低到高进样→回归拟合→验收→保存曲线;目的是建立“浓度–响应”直线,保证定量准确。以下按操作顺序给出可直接执行的步骤(依据JJF1568‑2016)。
一、校准前准备(必须到位)
仪器状态
开机预热30–60min,光源、检测器、恒温系统稳定。
检查泵管、管路无泄漏、无气泡;泵压稳定、气泡规律。
流通池清洁、无污渍;波长/滤光片正确。
试剂与纯水
所用试剂新鲜配制、纯度达标;用去离子水/超纯水(电阻≥18.2MΩ・cm)。
试剂管路充分置换,基线平稳无漂移(通常需1–2h)。
标准溶液(关键)
用国家有证标准物质(不确定度≤2%,k=2)。
配制5–7个浓度梯度(含空白0点),覆盖方法测量范围。
浓度分布:均匀分布、1个数量级内(高低浓度比≤20倍);最低点≈3倍检出限,最高点不超测量上限。
示例(水质):氨氮0、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0mg/L;总磷0、0.05、0.2、0.5、1.0mg/L。
现配现用,避免污染、挥发、吸附。
软件方法设置
新建/调用对应方法:设置进样时间、清洗时间、循环时间。
曲线类型选线性(Linear);单位、小数位数匹配标准溶液。
输入标准浓度序列(从低到高)。
二、基线与空白校准(先做)
所有管路通入去离子水,冲洗10–15min,基线平直、噪声≤±0.001AU。
切换为试剂空白(不含待测物、基质匹配),待基线稳定后,执行空白调零/基线校准,将空白响应设为0。
检查基线:无漂移、无杂峰、气泡均匀;否则排查泄漏、泵管老化、试剂污染。
三、增益优化(调响应范围)
取最高浓度标液进样,观察信号峰值。
调整增益(Gain):使峰值落在满量程80%–90%(如0.8–0.9AU);过高则降增益,过低则升增益。
增益固定后,不得再改,否则曲线失效。
四、标准系列进样(从低到高)
标液按浓度由低到高排列(避免高浓度残留污染低浓度)。
每个浓度重复进样3次,取平均响应值(吸光度/峰高)。
进样间隔:保证清洗时间足够,carry-over(残留)<1%。
观察峰形:对称、无拖尾、无锯齿;异常时检查气泡、泵管、试剂。
五、线性回归与曲线生成
软件自动做线性回归:A=aC+b(A=响应,C=浓度,a=斜率,b=截距)。
核心验收指标(必须同时满足):
相关系数R²≥0.999(关键)。
截距|b|≤0.01(接近0)。
各点残差≤±2%,无明显偏离点。
不合格处理:
R²<0.999:检查标液配制、管路污染、气泡、泵管老化;重新进样。
截距过大:空白污染、试剂不纯、基线不稳;重做空白与基线。
六、曲线保存与验证
合格后保存曲线,命名清晰(如“氨氮_20260531”)。
用中间浓度标液做QC验证:实测值与理论值偏差≤3%为合格。
记录校准日志:日期、标液信息、曲线参数、R²、校准人。
七、校准周期与维护
线性校准:每日开机、每批样品、换试剂、换泵管、结果漂移时必做。
基线/空白:每次开机、换试剂后。
流量/泵管:每月或压力异常时。
关键注意事项(避坑)
❌高→低进样(易残留);✅严格低→高。
❌用不纯/过期标液;✅有证、现配。
❌基线不稳就校准;✅基线平直、噪声小。
❌增益中途改动;✅固定后再进样。